目前较简便而实用的是涂片和淋菌培养。男性急性淋病直接涂片检查到多形核白细胞内革兰氏阴性双球菌即可成立诊断，其阳性率可达95％，女性患者宫颈分泌物中检查如找到典型的细胞内革兰氏阴性菌也可成立诊断，但女性宫颈和阴道中杂菌很多，有的杂菌很像淋球菌给诊断造成困难，因此女性患者及症状轻或无症状的男性患者均以作淋菌培养检查为宜。根据菌落形态、菌落氧化酶试验阳性和从菌落涂片淋菌形态作出诊断，必要时可作糖发酵试验及荧光抗体检查加以确诊。对淋菌培养阴性、病史及体征怀疑淋菌感染者，亦可应用多聚酶链式反应（PCR）检测淋菌DNA以协助诊断。